ADN recombinantes en la naturaleza y ADN recombinante artificial en glioma

ADN recombinante en la naturaleza
Las bacterias cambian su dotación genética, transfieren fragmentos de ADN y lo recombina en el cromosoma de bacterias receptoras. Se realiza por tres mecanismos: transformación, el ADN exógeno ingresa e intercambiar segmentos con el ADN principal; transducción, un vector transporta el ADN y conjugación, necesita contacto por pili-F entre bacteria donadora y receptora. 
ADN recombinante artificial en glioma

En los gliomas se identificó alteraciones en p53 y amplificaciones del gen EGFR. Por ello, el tratamiento contra el gen EGFR es la inmunoterapia pasiva con anticuerpos monoclonales. La Nimotuzumab es un anticuerpo monoclonal, inmunoglobulina de isotipo IgG1 formado por tecnología de ADN recombinante y producido en líneas de células de mamíferos.

T: Nimotuzumab, anticuerpo monoclonal e inmunoglobulina de isotipo IgG1.
O: Anticuerpo monoclonal con tecnología de ADN recombinante para tratar gliomas
G: Gen EGFR, chEGFR-III y chEGFR-siteC
ER: EcoRI
EL: ADN ligasa
V: Fagémido pCS1 / pcDNA3
CR: Células eucariota de mamíferos
MTG: Transferencia usando polietilenimina
MIC: Los clones positivos que producen anticuerpos recombinantes completos se cribaron mediante ELISA en placas de microvaloración de cloruro de polivinilo recubiertas con una IgG antihumana.


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Técnicas de secuenciación en SARS-CoV-2 (Covid-19)

Técnica de secuenciación por nanoporos: rápida, flexible y de bajo costo. Utiliza un instrumento portátil, que permite secuenciar directamente el ARN viral completo y detectar las modificaciones o metilaciones en menos de 8 horas. La hebra de ARN pasa por el poro de un nanómetro de diámetro en una proteína sintética, en una membrana de polímero resistente a la electricidad. Al pasar por el campo eléctrico se detecta alteraciones en la densidad del flujo eléctrico; esto permite identificar la secuencia de nucleótidos. La información obtenida identifica: mutaciones por sustitución, inserciones o deleciones en el genoma, alteraciones de las propiedades y cambio fenotípico; siendo indispensable para rastrea el virus, los contagios y comprender la pandemia.


 ‌Referencia bibliográfica





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Prueba RT-PCR en SARS-CoV-2 (Covid-19)

Tema: Método de laboratorio para detectar material genético del SARS-CoV-2 en pacientes con Covid-19  
Objetivo: Detectar la presencia de material genético especifico y cuantificación de ácidos nucleicos del SARS-CoV-2
Muestra biológica: Material genético del virus en el tracto respiratorio superior.
Tipo de Ácido nucleico: ARN del virus
Gen o secuencia para amplificar: La transcriptasa inversa será la encargada de extender y crear, a partir de ARN, ADN complementario. Se requiere de la lectura de ARN polimerasa dependiente del ARN, ORF1ab, gen E, N y S. El ADN vírico obtenido repite ciclos y produce copias. El resultado positivo radica en la amplificación del gen ORF1ab, gen N o gen E
Tipo de PCR: RT-PCR en tiempo real 
Visualización: Cuantificación absoluta o relativa y magnitud de la fluorescencia después de cada ciclo, que si supera el nivel, confirma la presencia del virus. 

‌Referencia bibliográfica


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Alteraciones de la Epigenómica en SARS-CoV-2 (Covid-19)

La alteración del epigenoma inicia durante la interacción entre el receptor de glicoproteína de pico viral, la proteína ECA2 y el correceptor dipeptidil peptidasa-4. Pues se conoce que, la expresión de ECA2 se regula por metilación de ADN, histonas y modificaciones en la variabilidad de ARNs no codificantes. Las enzimas epigenéticas: DNMT1, histona acetiltransferasa 1, histona desacetilasa 2 y lisina desmetilasa 5B son responsables de la modificación y buscan controlar la respuesta inmune del hospedador, afectando negativamente y propagando la infección. También, la alteración en la maquinaria reguladora del epigenoma del huésped se relacionan con la edad, si esta es mayor, obstaculizará las defensas virales, convirtiéndose en un riesgo.

‌Referencia bibliográfica

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Alteración de la Traducción en SARS-CoV-2 (Covid-19)

Las vesículas endocíticas, que ingresan a la célula, se adueña de la maquinaria energética de la traducción y son los ribosomas quienes permiten la lectura del material genético, como ARNm, a partir de ARN +. Se requiere de poliproteínas: pp1a y pp1ab, que forman complejos, y ARN polimerasa dependiente de ARN, que fabrica el intermediario de la replicación ARN -. Además, existen subgenomas que forman las poliproteínas M, E, S y N; estas proteínas van a la replicación para completar la información genética o al RER y aparato de Golgi para convertirse en proteínas activas con características postraduccionales.


‌Referencia bibliográfica

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Alteraciones de la Transcripción en SARS-CoV-2 (Covid-19)

El complejo RTC utiliza el ARN genómico (ARNg) de la cadena (+) como molde, para traducir las poliproteínas 1a/1b. Las poliproteínas no estructurales (nsps) tienen acción de tipo proteasa, ARN polimerasa, helicasa, exorribonucleasa, endorribonucleasa y metiltransferasa. Por otro lado, las poliproteínas estructurales principales (N,S,M,E) se traducirán a partir de los ARN subgenómicos (ARNsg) producidos en la transcripción discontinua para forman una partícula viral. La proteína N se une al ARNg en la cadena (+) y forma el complejo de nucleoproteína. Las proteínas S, M y E ingresan al retículo endoplásmico y se completan en él y en el aparato de Golgi, posterior, se eliminan a través del aparato de Golgi y las vesículas. 


‌Referencia bibliográfica
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Alteraciones de la replicación o de la genómica en SARS-CoV-2 (Covid-19)

La polaridad en la replicación del ARN va de ARN(+)ss a ARN(-)ss, para formar un molde ARN(+)ss. La proteína S, gracias al correceptor TMPRSS2, se une al receptor ECA2 por la subunidad s1 (RBD). El virus ingresa por endocitosis y se fusiona hasta envolverse con la membrana celular y formar endosomas. Posterior, se libera el genoma viral y en los ribosomas se traduce para formar poliproteínas virales pp1a y pp1ab. Por proteólisis y gracias a la replicasa, que codifica los ORF1a y 1b, se forman 4 poliproteínas estructurales principales (N,S,M,E) y 16 proteínas no estructurales nsp. Esto forma el complejo replicasa transcriptasa RTC, que realiza la síntesis del ARN genómico y no genómico.


‌Referencia bibliográfica
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Corona Virus Disease 2019 o COVID-19

Enfermedad infecciosa provocada por el coronavirus del síndrome respiratorio agudo severo, SARS-CoV-2, nuevo coronavirus proveniente de la familia de virus monocatenarios, del orden Nidovirales. La OMS informó el primer brote de la enfermedad en diciembre del 2019 en Wuhan, China. La enfermedad se transmite por particulas y gotas respiratorias de una persona infectada. Desencadenando cuadros respiratorios leves a moderados; en personas mayores con enfermedades cardiovasculares, respiratorias o diabetes, se presenta cuadros graves. Los signos y síntomas más frecuentes son la fatiga, falta de aire al respirar, tos, dolor en articulaciones y pecho. 



¡Infórmate, cuídate y cuida a tu familia!

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¡BIENVENID@S!


“Nadie que haya dado lo mejor de sí mismo lo ha lamentado nunca” George Halas.


Holaa, mi nombre es Milena Nicole Pulamarin Vasco, soy estudiante de tercer semestre de la carrera de Medicina en la Universidad Central del Ecuador.
 
En este blog encontrarás información educativa e interesante, enfocada en Biología Célular y Molecular. Espero que esta información nos ayude a comprender y aprender juntos esta asignatura.



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